ICS 67.050 X 04 GR 中华人民共和国国家标准 GB/T 16285—2008 代替GB/T16285—1996 食品中葡萄糖的测定 酶-比色法和酶-电极法 Determination of glucose in food- Enzyme-colorimetric method and enzyme-electrode method 2008-06-25发布 2009-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T16285—2008 前言 本标准代替GB/T16285一1996《食品中葡萄糖的测定方法 酶-比色法和酶-电极法》。 本标准与GB/T16285—1996相比主要变化如下： 标准名称改为：食品中葡萄糖的测定酶-比色法和酶-电极法； 按GB/T1.1—2000和GB/T20001.4—2001的规定，修改了文本格式。 本标准的酶-比色法为仲裁法；酶-电极法为快速法。 本标准的附录A、附录B为规范性附录。 本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国农垦北方食品监测中心（酶-比色法）、山东省科学院生物研究所（酶-电 极法）。 本标准主要起草人：张宗城、刘宁、冯德荣、孙士青、宋家华 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T16285—1996。 GB/T16285—2008 食品中葡萄糖的测定 酶-比色法和酶-电极法 1范围 本标准规定了酶-比色法和酶-电极法测定食品中葡萄糖的分析步骤 本标准适用于各类食品中葡萄糖的测定；亦适用于食品中其他组分转化为葡萄糖的测定 本标准的酶-比色法的最低检出限量为0.01μg/mL；酶-电极法的最低检出限量为1.0mg/100mL。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法（GB/T6682—1992，neqISO3696：1987） 3酶-比色法 3.1方法提要 葡萄糖氧化酶（GOD)在有氧条件下，催化β-D-葡萄糖（葡萄糖水溶液）的氧化反应，生成D-葡萄糖 酸--内酯和过氧化氢。受过氧化物酶（POD）催化，过氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色醌亚 胺。在波长505nm处测定醒亚胺的吸光度，计算食品中葡萄糖的含量。 3.2反应式 POD H,O,+C,H,OH+CnHiN,O- -C, H,NO+H,O 3.3试剂和溶液 3.3.1试剂和分析用水 所有试剂均使用分析纯试剂，或生化试剂；分析用水应符合GB/T6682规定的二级水规格，或重蒸 馏水。 3.3.2组合试剂盒 1号瓶：内含磷酸盐缓冲溶液（0.2mol/LpH=7.0)100mL,其中4-氨基安替比林为0.00154mol/L 2号瓶：内含苯酚溶液（0.022mol/L）100mL。 3号瓶：内含葡萄糖氧化酶（glucoseoxidase）4ooU（活力单位）、过氧化物酶（辣根，peroxidase） 1000U（活力单位）。 葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的活力要求和判定见附录A。 1、2、3号瓶应在约4℃保存。 3.3.3酶试剂溶液 中，轻轻摇动（勿剧烈摇动），使葡萄糖氧化酶和过氧化物酶完全溶解。此溶液应在约4℃保存，有效期 1个月。 3.3.4亚铁氰化钾溶液（0.085mol/L） 称取3.7g亚铁氰化钾，溶于100mL水中，摇匀。 1