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ICS 11. 220 B 41 中华人民共和国国家标准 GB/T 17999.4—2008 代替GB/T17999.3—1999 SPF鸡 微生物学监测 第4部分:SPF鸡 血清平板凝集试验 SPF chicken—Microbiological surveillance- Part 4: Serum plate agglutination test for SPF chicken 2008-12-31发布 2009-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T17999.4—2008 前言 GB/T 17999《SPF鸡 微生物学监测》分为10个部分: 第1部分:SPF鸡 微生物学监测总则; 第2部分:SPF鸡 红细胞凝集抑制试验; 第3部分:SPF鸡 血清中和试验; 第4部分:SPF鸡 血清平板凝集试验; 第5部分:SPF鸡 琼脂扩散试验; 第6部分:SPF鸡 酶联免疫吸附试验; 第7部分:SPF鸡 胚敏感试验; 第8部分:SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验; 第9部分:SPF鸡 试管凝集试验; 第10部分:SPF鸡 间接免疫荧光试验。 本部分为GB/T17999的第4部分。 本部分修订参照了NY/T553—2002《禽支原体病诊断技术》和NY/T536—2002《鸡伤寒和鸡白痢 诊断技术》中的有关规定。 本部分代替GB/T17999.3—1999《SPF鸡血清平板凝集试验》。 本部分与GB/T17999.3—1999相比主要变化如下: 增加了生理盐水作为阴性对照。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。 本部分起草单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法 斯家禽有限公司。 本部分主要起草人:曲连东、姜骞、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、刘家森、司昌德、郭东春、于海波、 孟庆文。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为: GB/T17999.3—1999。 SZK SIG GB/T17999.4—2008 SPF鸡微生物学监测 第4部分:SPF鸡 血清平板凝集试验 1范围 GB/T17999的本部分规定了鸡血清平板凝集试验的技术要求。 pullorum)、鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum)、滑液囊支原体(Mycoplasmasynouiae)副鸡嗜 血杆菌(Haemophilusparagauinarum)。 2原理 血清平板凝集试验是细菌性抗原与相应的抗体结合后,在适量的电解质参与下,经过一段时间出现 肉眼可见的凝集现象,常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体 3试剂和材料 3.1试剂 3.1.1凝集抗原。 3. 1. 2阴性血清、阳性血清。 3.1.3被检血清。 3.2材料 玻璃板,移液器(TD10μL~200μL)及吸头。 4操作程序 4.1使用前10min~20 min自冰箱取出抗原、阴性标准血清、阳性标准血清及被检血清,使其达到 室温。 4.2用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴(0.025mL~0.05mL),垂直滴于玻璃板上,然后迅速在 抗原旁边滴加同量的被检血清一滴(0.025mL0.05mL)。 4.3用牙签使血清与抗原混合均匀,涂布成直径为1cm~2cm的片状,不断摇动玻璃板,2min内观 察结果。 4.4试验应在20℃~25℃条件下进行 4.5每批试验应设阳性血清、阴性血清及生理盐水对照。 5结果判定 在2min内出现50%(十十)以上凝集者为阳性。2min内不凝集(一)者为阴性,介于上述两者之 间为可疑,进行复核试验,如仍为可疑,判为阳性。凝集判读标准见表1。 1

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