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ICS 67.040 X 04 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T 21915—2008 食品中纳他霉素的测定 液相色谱法 Determination of natamycin in food- High-performance liquid chromatography 2008-05-16发布 2008-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T21915—2008 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由全国食品安全应急标准化工作组提出并归口。 本标准主要起草人:赵丽秀、李乃洁、苏锡辉、张凯、张丽君、吕成学、吴玉銮、赵检、黄士军、张凤清。 GB/T21915—2008 食品中纳他霉素的测定液相色谱法 1范围 本标准规定了食品中纳他霉素的液相色谱测定方法。 本标准适用于食品中纳他霉素的测定。 本标准定量检出限为0.5mg/kg(固体和半固体样品),0.5mg/L(液体样品)。 2原理 样品经甲醇提取,采用加水冷冻去除样品中的脂肪成分或离心的方式净化,反相液相色谱-紫外检 测器测定,外标法定量。 3试剂和材料 3.1水:去离子水或相当纯度的水 3.2甲醇:分析纯、色谱纯。 3.3纳他霉素(natamycin):纯度≥95% 100μg/mL的标准储备液。 3.5冰乙酸:优级纯。 3.60.45μm、0.22μm针头式过滤器(水性)。 4仪器 4.1高效液相色谱仪:配紫外检测器。 4.2超声波清洗器。 4.3电子天平:感量0.1mg。 4.4 注射器:一次性,10mL。 4.5漏斗:直径大约7cm。 4.6冰箱:-20℃~-15℃。 4.7离心机。 5样品制备 5.1固体及半固体样品 5.1.1乳酪、火腿、酸奶等样品 准确称取10.00g样品,加入30mL甲醇超声提取30min,加水10mL摇匀后放人冰箱中冷冻 1h,取出冷冻后的样品立即过滤,滤液放置至室温后,依次过0.45μm和0.22μm针头式过滤器,收集 滤液约2mL上机测定。纳他霉素标准品谱图参见图A.1,乳酪、火腿样品回收率图参见图A.2和 图A.3。 5.1.2月饼、糕点样品 准确称取5.00g月饼皮,置于离心管中,加入30mL甲醇超声提取30min,加水10mL摇匀后置 于离心机中以3500r/min离心5min,上清液依次过0.45μm和0.22um针头式过滤器,收集滤液约 2mL上机测定。月饼、糕点样品回收率图参见图A.4、图A.5。 1 GB/T21915—2008 5. 2 果汁饮料样品 准确量取果汁饮料样品10.0mL,加人30mL甲醇,超声提取30min,提取液依次过0.45μm和 0.22μm针头式过滤器,收集滤液约2mL上机测定。橙汁样品回收率图参见图A.6。 6 色谱测定 6.1 色谱柱:Cls柱,5um,4.6mmX150mm(或相当型号色谱柱)。 6.2流动相:甲醇十水+乙酸(60十40十5)。 6.3流速:1.0mL/min。 6.4检测波长:305nm。 6.5进样量:10μL。 7计算 按式(1)计算固体、半固体样品(乳酪、糕点、火腿、月饼、酸奶)中纳他霉素的含量,按式(2)计算液体 样品中纳他霉素的含量。 ..(1) m×1000 式中: X——试样中纳他霉素的含量,单位为微克每克(μg/g); c——由标准曲线得到样品溶液中纳他霉素的含量,单位为微克每毫升(μg/mL); V—样品溶液定容体积,单位为毫升(mL); m—样品质量,单位为克(g)。 计算结果保留三位有效数字。 X-CXV .(2) V2 式中: X-试样中纳他霉素的含量,单位为微克每毫升(ug/mL); c—由标准曲线得到样品溶液中纳他霉素的含量,单位为微克每毫升(ug/mL); Vi———样品溶液定容体积,单位为毫升(mL); SAG Vz—样品量取体积,单位为毫升(mL)。 计算结果保留三位有效数字。 8精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 2 GB/T21915—2008 附录A (资料性附录) 纳他霉素标准品谱图及几种样品回收率图 A.1纳他霉素标准品色谱图见图A.1。 7. 26 01 00009 55 000 = 50 000 3 45 000 - 4( 0D0 = E 000 06 25 000 E00002 1b 000 -000 01 5 000 1.69 1. 55/1.81 417 6. 74 8. 18 8. 65 9.46 .9.74 3. th 4. 27 / 2 B 9 Q 1 f/min 图A.1纳他霉素标准品色谱图- 纳他霉素含量10μg/mL A.2乳酪样品回收率图见图A.2 4. 14 28000号 26 000- 21 000 - 22 000 20 000 -000 BT 16 000= 14 000- 12 000- 10 000- 8 000 0009 1 000 1. 65 6.87 000z 2.04 2.85 6.57 6.09 8.00 8- 59 9.20 9, 44 11.18 7 们 1 4 5 9 (/min a)乳酪样品回收率图 纳他霉素添加量0.5μg/mL 4. 12 30 000- F000 Cz 20 000 10 000 F000 9 1.65 6. 79 8. 699. 05. 2. 50 9. 60 0.430.37 1. 16 .23 七门 2 7 U 3 A 6 i/nin b)乳酪样品回收率图 纳他霉素添加量1.0ug/mL 图 A.2 乳酪样品回收率图 3
GB-T 21915-2008 食品中纳他霉素的测定 液相色谱法
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