SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1166—2010 代替SN/T1166.1—2002.SN/T1166.2—2002.SN/T1166.3—2006 水泡性口炎检疫技术规范 Quarantine protocolfor vesicular stomatitis 行业标准信息服务平台 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1166—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1166.1-2002《水泡性口炎补体结合试验操作规程》、SN/T1166.2—2002《水泡 性口炎微量血清中和试验操作规程》和SN/T1166.3一2006《水泡性口炎逆转录聚合酶链反应操作 规程》。 本标准与SN/T1166.1—2002、SN/T1166.2—2002和SN/T1166.3—2006相比，主要技术变化 如下： 增加了水泡性口炎的病毒分离及鉴定； 一增加了荧光反转录聚合酶链反应； 一增加了竞争酶联免疫吸附试验。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、中华人民共和国云南出人境检验检 疫局。 本标准主要起草人：花群义、阮周曦、杨俊兴、杨云庆、秦智锋、吕建强、曾少灵、林庆燕、宗卉、 张彩虹、周晓黎、董俊。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 1166.1—2002; SN/T 1166.2—2002; -SN/T1166.3—2006。 行业标准信息服务平台 1 SN/T1166—2010 口口口口.口口口口口口口口口口口口 水泡性口炎检疫技术规范 1范围 本标准规定了动物水泡性口炎的病毒分离及鉴定、反转录聚合酶链反应、荧光反转录聚合酶链反 应、中和试验、竞争酶联免疫吸附试验的技术要求。 本标准适用于动物水泡性口炎的检验检疫 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18088出人境动物检疫采样 3缩略语 以下缩略语适用于本文件。 BHK-21:仓鼠肾细胞 BLP:乳糖蛋白陈缓冲肉汤 CPE:致细胞病变作用 Ct值：每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数 c-ELISA：竞争酶联免疫吸附试验 业标准信息服务平台 DEPC：焦碳酸二乙酯 McAb：单克隆抗体 OD值：光密度值 PI:抑制百分比 TCID5o：半数组织培养感染量 Vero：非洲绿猴肾细胞 VSV:水泡性口炎病毒 VSV-IND：水泡性口炎病毒印地安那型 VSV-NJ：水泡性口炎病毒新泽西型 4病毒分离与鉴定 4.1病毒分离 4.1.1样品的采集：按GB/T18088进行。主要采集动物口、蹄冠上或乳头上的水泡上皮组织。采集 后立即冷藏送检或置碳酸缓冲甘油（配方见附录A）中低温保藏。采集到的水泡液置火菌瓶中，冷藏送 检或低温保藏。若从冻肉中采样，可采淋巴结或组织；采集的精液样品应不少于1mL，冻精样品每头每 批次取样3管5管；无症状或无水泡的活动物采集抗凝全血，胚胎及其冲洗液 4.1.2样品的处理：将采集到的上皮、淋巴结或组织样品，经研磨后用0.01mol/LpH7.2的PBS（配 1