(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202110739700.2 (22)申请日 2021.06.30 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113461818 A (43)申请公布日 2021.10.01 (73)专利权人 徐州医科 大学 地址 221004 江苏省徐州市 云龙区铜山路 209号 (72)发明人 王刚　郑骏年　赵博　李慧忠　 曹培育　李新宇　王蒙　康晓彤　 王亚楠　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 代理人 李红伟　孟祥斌 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C07K 19/00(2006.01)C12N 5/10(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 47/68(2017.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) (56)对比文件 CN 109880804 A,2019.0 6.14 CN 111875708 A,2020.1 1.03 CN 112592927 A,2021.04.02 CN 112251412 A,2021.01.2 2 CN 111704674 A,2020.09.25 WO 2016014535 A1,2016.01.28 WO 2005034733 A2,2005.04.21 CN 111235113 A,2020.0 6.05 CN 111269326 A,2020.0 6.12 审查员 张临政 (54)发明名称 靶向CD276的全人源抗体scFv、 嵌合抗原受 体、 工程化免疫细胞及其制备方法 (57)摘要 本发明提供了靶向CD276的全人源抗体 scFv、 嵌合抗原受体、 工程化免疫细胞及其制备 方法。 本发明的嵌合抗原受体包含抗原结合区、 跨膜结构域、 共刺激结构域、 胞内信号传导结构 域。 本发明还 涉及包含本发明的新型嵌合抗原受 体的工程化免疫细胞、 免疫细胞群体和药物组合 物， 以及所述工程化免疫细胞/药物组合物在治 疗肿瘤中的用途。 权利要求书2页 说明书11页 序列表16页 附图4页 CN 113461818 B 2022.01.21 CN 113461818 B 1.一种分离的抗CD276蛋白的抗体， 其包含如SEQ  ID NO:1‑3所示的重链可变区的 CDR1‑3以及如SEQ ID NO:4‑6所示的轻链可变区的CDR 1‑3。 2.根据权利要求1所述的抗体， 其特征在于， 所述抗体包含SEQ  ID NO:7所示的重链可 变区； 所述 抗体包含SEQ ID NO:8所示的轻链可变区。 3.一种嵌合抗原受体， 其包含权利要求1或2所述的抗体； 所述嵌合抗原受体还包含跨 膜结构域、 胞内信号传导结构域； 所述嵌合抗原受体包含或不包含共刺激结构域； 所述 嵌合 抗原受体包 含或不包 含前导序列。 4.根据权利要求3所述的嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述嵌合抗原受体的氨基酸序列 包含如SEQ IDNO: 15或SEQ IDNO: 16所示的氨基酸序列。 5.编码权利要求1或2所述的抗体或权利要求3或4所述的嵌合抗原受体的核酸分子或 包含所述核酸分子的载体。 6.根据权利要求5所述的核酸分子或包含所述核酸分子的载体， 其特征在于， 所述核酸 分子包括SEQ  ID NO:17、 SEQ  ID NO:18或SEQ  ID NO:33所示的序列。 7.一种工程化细胞， 所述工程化细胞表达权利要求1或2所述的抗体或权利要求3或4所 述的嵌合 抗原受体。 8.根据权利要求7所述的工程化细胞， 其特征在于， 所述述工程化细胞包含工程化免疫 细胞； 所述工程化免疫细胞包含T淋巴细胞、 NK细胞， 单核细胞、 巨噬细胞、 树突状细胞、 NKT 细胞。 9.权利要求7或8所述的工程化细胞的制备方法， 其特征在于， 所述制备方法包括： 将含 有权利要求5或6所述的核酸分子或包 含所述核酸分子的载体导入细胞中。 10.一种缀合物， 其包含权利要求1或2所述的抗体以及连接于所述抗体的修饰部分； 所 述修饰部分包括可检测的标记或治疗剂。 11.根据权利要求10所述的缀合物， 其特征在于， 所述可检测的标记包括酶、 放射性核 素、 荧光染料、 发光物质、 生物素； 所述治疗剂包括具有抗肿瘤活性的药物或细胞毒剂。 12.一种药物组合物或试剂盒， 其特征在于， 所述药物组合物或试剂盒包括权利要求1 或2所述的抗体、 权利要求3或4所述的嵌合抗原受体、 权利要求5或6所述的核酸分子或包含 所述核酸分子的载体、 权利要求7或8所述的工程 化细胞、 权利要求10或1 1所述的缀 合物。 13.一种非诊断目的 的检测CD276蛋白或其 抗原片段的方法， 所述方法包括如下步骤： 1） 获取含有CD276蛋白或其 抗原片段的样品； 2） 将步骤  1） 收集的样品与权利要求1或2所述的抗体， 或权利要求10或11所述的缀合 物接触； 3） 检测抗体 ‑抗原复合物的存在。 14.一种应用， 所述应用包括以下任一项： 1） 权利要求1或2所述的抗体、 权利要求3或4所述的嵌合抗原受体、 权利要求5或6所述 的核酸分子或包含所述核酸分子的载体、 权利要求7或8所述的工程化细胞、 权利要求10或 11所述的缀 合物在制备治疗实体瘤的药物中的应用； 2） 权利要求1或2所述的抗体、 权利要求3或4所述的嵌合抗原受体、 权利要求5或6所述 的核酸分子或包 含所述核酸分子的载体在制备权利要求7或8所述的工程 化细胞中的应用； 3） 权利要求1或2所述的抗体在制备权利要求10或1 1所述的缀 合物中的应用；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113461818 B 24） 权利要求1或2所述的抗体在制备检测CD276蛋白或其 抗原片段的试剂盒中的应用； 5） 权利要求1或2所述的抗体在制备诊断肿瘤的试剂盒中的应用。 15.根据权利要求14所述的应用， 其特征在于， 所述实体瘤包括肉瘤、 肺癌、 肝癌、 皮肤 癌、 子宫癌、 子宫颈癌、 子 宫内膜癌、 腺癌、 乳 腺癌、 胰腺癌、 结肠直肠癌、 肛门癌、 肺癌、 肾癌、 膀胱癌、 肝癌、 前列腺癌、 卵巢癌、 原发性或转移性黑色素瘤、 鳞状细胞癌、 基底细胞癌、 脑 癌、 血管肉瘤、 血 管内皮瘤、 头 颈癌、 甲状腺癌、 软组织肉瘤、 骨肉瘤、 睾丸癌、 胃肠道癌。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113461818 B 3