ICS11.220 CCSB41 中华人民共和国国家标准 GB/T45101—2024 动物炭疽诊断技术 Diagnostictechniquesforanimalanthrax 2024-12-31发布 2025-07-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布 目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 引言 Ⅳ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 缩略语 1 …………………………………………………………………………………………………… 5 生物安全措施 1 …………………………………………………………………………………………… 6 临床诊断 2 ………………………………………………………………………………………………… 6.1 流行特点 2 …………………………………………………………………………………………… 6.2 临床症状 2 …………………………………………………………………………………………… 6.3 病理变化 2 …………………………………………………………………………………………… 6.4 结果判定 3 …………………………………………………………………………………………… 7 样品的采集、保存、运输和处理 3 ………………………………………………………………………… 7.1 样品的采集 3 ………………………………………………………………………………………… 7.2 样品的保存与运输 3 ………………………………………………………………………………… 7.3 样品的处理 3 ………………………………………………………………………………………… 8 实验室诊断 4 ……………………………………………………………………………………………… 8.1 染色镜检 4 …………………………………………………………………………………………… 8.2 分离与鉴定 5 ………………………………………………………………………………………… 8.3 γ噬菌体裂解试验和青霉素抑制试验 6 …………………………………………………………… 8.4 PCR 6 ………………………………………………………………………………………………… 8.5 Real-timePCR 8 ……………………………………………………………………………………… 8.6 环状沉淀试验(Ascoli试验) 9 ……………………………………………………………………… 9 综合判定 10 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(规范性) 试剂的配制 11 …………………………………………………………………………… A.1 草酸铵结晶紫染色液 11 …………………………………………………………………………… A.2 革兰氏碘液 11 ……………………………………………………………………………………… A.3 沙黄复染液 11 ……………………………………………………………………………………… A.4 碱性美蓝染色液 11 ………………………………………………………………………………… A.5 5%~7%马或羊血琼脂平板 11 …………………………………………………………………… A.6 PLET琼脂平板 11 …………………………………………………………………………………… A.7 普通营养肉汤 11 …………………………………………………………………………………… A.8 普通营养琼脂平板 11 ……………………………………………………………………………… ⅠGB/T45101—2024 A.9 0.7%碳酸氢钠琼脂平板 11 ………………………………………………………………………… A.10 50×TAE电泳缓冲液 12 …………………………………………………………………………… A.11 2%琼脂糖凝胶 12 ………………………………………………………………………………… A.12 0.5%苯酚生理盐水 12 ……………………………………………………………………………… 附录B(资料性) 核酸检测用引物、探针序列信息及扩增结果图 13 …………………………………… B.1 炭疽杆菌PCR引物 13 ……………………………………………………………………………… B.2 炭疽杆菌PCR扩增产物电泳图 13 ………………………………………………………………… B.3 Real-timePCR引物和探针 13 ……………………………………………………………………… B.4 炭疽杆菌PA基因实时荧光PCR扩增曲线图 14 ………………………………………………… B.5 炭疽杆菌CA基因实时荧光PCR扩增曲线图 14 ………………………………………………… 附录C(资料性) 炭疽杆菌PCR阳性对照重组质粒的目的基因序列 15 ……………………………… C.1 炭疽杆菌保护性抗原基因(PA)重组质粒参考序列 15 …………………………………………… C.2 炭疽杆菌荚膜基因(CA)重组质粒参考序列 15 …………………………………………………… 附录D(资料性) 环状沉淀试验结果图 16 ………………………………………………………………… 参考文献 17 …………………………………………………………………………………………………… ⅡGB/T45101—2024